քրոմատոգրաֆիան, որը նաև հայտնի է որպես «քրոմատոգրաֆիական վերլուծություն», «քրոմատոգրաֆիա», տարանջատման և վերլուծության մեթոդ է, որն ունի կիրառությունների շատ լայն շրջանակ անալիտիկ քիմիայի, օրգանական քիմիայի, կենսաքիմիայի և այլ ոլորտներում:
Քրոմատոգրաֆիայի հիմնադիրը ռուս բուսաբան Մ.Ցվետերն է։1906 թվականին ռուս բուսաբան Զվետերը հրապարակեց իր փորձի արդյունքները. Բույսերի պիգմենտները առանձնացնելու համար նա լցրեց նավթային եթերի էքստրակտը, որը պարունակում էր բուսական պիգմենտներ, ապակե խողովակի մեջ, որը պարունակում էր կալցիումի կարբոնատ փոշի և այն ողողեց նավթային եթերով վերևից ներքև:Քանի որ տարբեր գունանյութեր ունեն տարբեր կլանման կարողություններ կալցիումի կարբոնատի մասնիկների մակերեսի վրա, տարրալվացման գործընթացում տարբեր պիգմենտներ տարբեր արագություններով շարժվում են ներքև՝ այդպիսով ձևավորելով տարբեր գույների շերտեր:Պիգմենտի բաղադրիչներն առանձնացվել են։Նա անվանեց այս տարանջատման մեթոդը քրոմատոգրաֆիա:
Բույսերի տերևների պիգմենտի տարանջատման փորձի սխեմատիկ ներկայացում
Տարանջատման մեթոդների շարունակական զարգացման հետ մեկտեղ տարանջատման առարկա են դառնում ավելի ու ավելի շատ անգույն նյութեր, քրոմատոգրաֆիան նույնպես աստիճանաբար կորցրեց «գույն» իմաստը, սակայն անվանումը դեռ կիրառվում է այսօր։
Քրոմատոգրաֆիկ դասակարգում
Քրոմատագրության էությունը մի գործընթաց է, որի ընթացքում բաժանվող մոլեկուլները բաժանվում և հավասարակշռվում են անշարժ և շարժական փուլերի միջև:Տարբեր նյութերը տարբեր կերպ են բաժանվում երկու փուլերի միջև, ինչը նրանց ստիպում է շարժական փուլով շարժվել տարբեր արագությամբ:Շարժական փուլի շարժումով խառնուրդի տարբեր բաղադրիչները միմյանցից բաժանվում են ստացիոնար փուլի վրա։Կախված մեխանիզմից, այն կարելի է բաժանել տարբեր կատեգորիաների.
1, ըստ երկփուլ ֆիզիկական վիճակի դասակարգման
Շարժական փուլ՝ գազային քրոմատոգրաֆիա, հեղուկ քրոմատոգրաֆիա, գերկրիտիկական հեղուկի քրոմատոգրաֆիա
Ստացիոնար փուլ՝ գազապինդ, գազահեղուկ;Հեղուկ-պինդ, հեղուկ-հեղուկ
2, ըստ ստացիոնար փուլային դասակարգման ձևի
Սյունակի քրոմատոգրաֆիա. փաթեթավորված սյունակային քրոմատոգրաֆիա, մազանոթային սյունակային քրոմատոգրաֆիա, միկրոփաթեթավորված սյունակային քրոմատոգրաֆիա, նախապատրաստական քրոմատոգրաֆիա
Հարթ քրոմատոգրաֆիա՝ թղթային քրոմատոգրաֆիա, բարակ շերտի քրոմատոգրաֆիա, պոլիմերային թաղանթային քրոմատոգրաֆիա
3, դասակարգված ըստ տարանջատման մեխանիզմի
Ադսորբցիոն քրոմատոգրաֆիա. Տարբեր բաղադրիչները բաժանվում են ըստ կլանման և կլանման կարողությունների:
Բաժանման քրոմատոգրաֆիա. Տարբեր բաղադրիչները բաժանվում են ըստ լուծիչում իրենց լուծելիության
Մոլեկուլային բացառման քրոմատագրություն. ըստ տարանջատման մոլեկուլային չափի ln իոնափոխանակման քրոմատագրություն.
Հարաբերական քրոմատոգրաֆիա. տարանջատում կենսաբանական մակրոմոլեկուլների միջև հատուկ մերձեցման միջոցով
Մազանոթային էլեկտրոֆորեզ. բաղադրիչները բաժանվել են ըստ շարժունակության և/կամ բաժանման վարքի տարբերությունների
Քիրալային քրոմատոգրաֆիան օգտագործվում է քիրալային դեղամիջոցների առանձնացման և վերլուծության համար, որոնք կարելի է բաժանել երեք կատեգորիաների.Chiral շարժական փուլային հավելումների մեթոդ;Chiral ստացիոնար փուլային լուծման մեթոդ
Հիմնական տերմինաբանություն քրոմատագրության համար
Ժամանակի նկատմամբ քրոմատոգրաֆիկ տարանջատումը հայտնաբերելուց հետո բաղադրիչների արձագանքման ազդանշանները գծագրելով ստացված կորերը կոչվում են քրոմատոգրամներ։
Ելակետային:Որոշակի քրոմատոգրաֆիկ պայմաններում ազդանշանի կորը, որն առաջանում է, երբ միայն շարժական փուլն անցնում է դետեկտորային համակարգով, կոչվում է բազային, ինչպես ցույց է տրված ot գծում:Երբ փորձարարական վիճակը կայուն էր, բազային գիծը հորիզոնական առանցքին զուգահեռ գիծ էր:Ելակետային գիծը ժամանակի ընթացքում արտացոլում է գործիքի, հիմնականում դետեկտորի աղմուկը:
Գագաթի բարձրությունը.ուղղահայաց հեռավորությունը քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետի և բազային գծի միջև, որը նշվում է h-ով, ինչպես ցույց է տրված AB' տողում:
Տարածաշրջանի լայնությունը:Քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետի շրջանի լայնությունը ուղղակիորեն կապված է տարանջատման արդյունավետության հետ:Քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետի լայնությունը նկարագրելու երեք եղանակ կա՝ ստանդարտ շեղում σ, գագաթնակետի լայնությունը W և FWHM W1/2:
Ստանդարտ շեղում (σ):σ-ը նորմալ բաշխման կորի երկու թեքման կետերի միջև կիսով չափ հեռավորությունն է, իսկ σ-ի արժեքը ցույց է տալիս սյունակից հեռու բաղադրիչների ցրվածության աստիճանը:Որքան մեծ է σ-ի արժեքը, այնքան ավելի ցրված են արտահոսքի բաղադրիչները, և այնքան վատ է տարանջատման ազդեցությունը:Ընդհակառակը, արտահոսքի բաղադրիչները կենտրոնացված են, և տարանջատման ազդեցությունը լավ է:
Պիկ լայնությունը W:Քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետի երկու կողմի հատման կետերը օգտագործվում են որպես շոշափող գծեր, իսկ բազային գծի հատումը կոչվում է գագաթնակետի լայնություն կամ բազային լայնություն, որը կարող է արտահայտվել նաև որպես W, ինչպես ցույց է տրված նկար IJ-ում:Նորմալ բաշխման սկզբունքի համաձայն՝ գագաթնակետի լայնության և ստանդարտ շեղման միջև կապը կարելի է ապացուցել որպես W=4σ։
W1/2:Գագաթի լայնությունը գագաթի բարձրության կեսում կոչվում է FWHM, ինչպես ցույց է տրված GH-ի հեռավորության համար:W1/2=2,355σ, W=1,699W1/2:
W1/2, W երկուսն էլ բխում են σ-ից և օգտագործվում են գագաթնակետային տարածքները հաշվարկելու համար, բացի սյունակի էֆեկտը չափելուց:FWHM չափումը ավելի հարմար է և առավել հաճախ օգտագործվող:
Համառոտ ամոփոփում
Քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետային արտահոսքի կորից կարելի է հասնել հետևյալ նպատակներին.
ա. Որակական վերլուծությունը կատարվել է քրոմատոգրաֆիկ գագաթների պահպանման արժեքի հիման վրա
բ, քանակական վերլուծություն՝ հիմնված քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետի տարածքի կամ գագաթնակետի վրա
Գ. Սյունակի տարանջատման արդյունավետությունը գնահատվել է ըստ քրոմատոգրաֆիկ գագաթի պահպանման արժեքի և գագաթնակետի լայնության
Քրոմատագրության մեջ ներգրավված հաշվարկի բանաձևը
1. Պահպանման արժեք
Պահպանման արժեքը պարամետր է, որն օգտագործվում է նկարագրելու այն աստիճանը, որով նմուշ բաղադրիչը պահպանվում է սյունակում և օգտագործվում է որպես քրոմատոգրաֆիկ բնութագրման ցուցիչ:Դրա ներկայացման մեթոդը հետևյալն է.
Պահպանման ժամանակը tR
Մահվան ժամանակըtM
Կարգավորեք պահպանման ժամանակը tR'=tR-tM
(Ստացիոն փուլում անցկացրած ընդհանուր ժամանակը)
Պահպանման ծավալը
VR=tR*F. (անկախ շարժական փուլի արագությունից)
Մեռած ծավալը
VM=tM*Fc
(Տիեզերքը, որը չի զբաղեցնում անշարժ փուլը ներարկիչից դետեկտոր հոսքի ուղու վրա)
Կարգավորեք VR-ի պահպանման ծավալը'=t'R*Fc
2. Հարաբերական պահպանման արժեք
Պահպանման հարաբերական արժեքը, որը նաև հայտնի է որպես տարանջատման գործակից, բաժանման գործակից կամ հարաբերական հզորության գործակից, որոշակի քրոմատոգրաֆիկ պայմաններում փորձարկվող բաղադրիչի պահպանման ժամանակի (ծավալի) հարաբերակցությունն է ստանդարտի ճշգրտված պահպանման ժամանակին (ծավալին):
Պահպանման հարաբերական արժեքները օգտագործվել են որոշակի գործառնական պայմանների ազդեցությունը վերացնելու համար, ինչպիսիք են հոսքի արագությունը և ամրագրման կորուստը, պահպանման արժեքների վրա:Հարաբերական պահպանման արժեքի ստանդարտը կարող է լինել փորձարկված նմուշի բաղադրիչ կամ արհեստականորեն ավելացված միացություն:
3. Պահպանման ինդեքս
Պահման ինդեքսը հաստատուն X լուծույթում փորձարկվող i նյութի պահպանման ինդեքսն է: Որպես հղման նյութեր ընտրվում են երկու n-ալաններ, որոնցից մեկն ունի N ածխածնային թիվ, իսկ մյուսը՝ N+n:Դրանց պահպանման ճշգրտված ժամանակը համապատասխանաբար t'r (N) և t'r (N+n) է, այնպես որ փորձարկվող i նյութի պահպանման ճշգրտված ժամանակը t'r (i) գտնվում է հենց նրանց միջև, այսինքն. t'r (N):
Պահպանման ինդեքսը կարող է հաշվարկվել հետևյալ կերպ.
4. Հզորության գործակից (k)
Հավասարակշռության դեպքում անշարժ փուլում (ներ)ում բաղադրիչի զանգվածի հարաբերակցությունը շարժական փուլին (մ), որը կոչվում է հզորության գործակից:Բանաձևը հետևյալն է.
5. Բաժանման գործակից (K) Հավասարակշռության մեջ բաղադրիչի կոնցենտրացիայի հարաբերակցությունը անշարժ փուլում (ներ) շարժական փուլին (մ), որը կոչվում է բաժանման գործակից:Բանաձևը հետևյալն է
K-ի և k-ի հարաբերությունները.
Այն արտացոլում է սյունակի տեսակը և դրա հանգույցի կառուցվածքի կարևոր հատկությունները
Համառոտ ամոփոփում
Պահպանման արժեքի և հզորության գործակցի և բաժանման գործակիցի միջև կապը.
Քրոմատոգրաֆիկ տարանջատումը հիմնված է ֆիքսված հարաբերական նմուշում յուրաքանչյուր բաղադրիչի կլանման կամ տարրալուծման ունակության տարբերության վրա, որը քանակապես կարող է արտահայտվել բաժանման K գործակցի (կամ հզորության գործակցի k) արժեքի չափով:
Ուժեղ կլանման կամ տարրալուծման ունակությամբ բաղադրիչներն ունեն մեծ բաժանման գործակից (կամ հզորության գործակից) և երկար պահպանման ժամանակ:Ընդհակառակը, թույլ կլանման կամ լուծելիություն ունեցող բաղադրիչներն ունեն բաժանման փոքր գործակից և կարճ պահպանման ժամանակ:
Քրոմատագրության հիմնական տեսությունը
1. Սկուտեղի տեսություն
(1) Առաջ քաշեք -- թերմոդինամիկական տեսություն
Այն սկսվեց Մարտինի և Սինջի կողմից առաջարկված աշտարակի ափսեի մոդելից:
Կտրող սյուն. սկուտեղի մեջ գազ-հեղուկ հավասարակշռության մի քանի անգամ՝ ըստ տարբեր տարանջատման եռման կետի:
Սյունակ. Բաղադրիչները հավասարակշռված են երկու փուլերի միջև մի քանի միջնորմներով և բաժանվում են ըստ բաժանման տարբեր գործակիցների:
(2) Վարկած
(1) Սյունակում կան բազմաթիվ սկուտեղներ, և բաղադրիչները կարող են արագ հասնել բաշխման հավասարակշռության սկուտեղի միջակայքում (այսինքն, սկուտեղի բարձրությունը):
(2) Շարժական փուլը մտնում է սյունակ ոչ թե անընդհատ, այլ պուլսացիոն, այսինքն՝ յուրաքանչյուր հատված սյունակի ծավալ է։
(3) Երբ նմուշը ավելացվեց յուրաքանչյուր սյունակի ափսեին, նմուշի տարածումը սյունակի առանցքի երկայնքով կարող էր անտեսվել:
(4) Բաժանման գործակիցը հավասար է բոլոր սկուտեղների վրա՝ անկախ բաղադրիչների քանակից:Այսինքն՝ բաժանման գործակիցը հաստատուն է յուրաքանչյուր տաբանի վրա։
(3) Սկզբունք
Սկուտեղի տեսության սխեմատիկ դիագրամ
Եթե միավոր զանգվածի բաղադրիչը, այն է՝ m=1 (օրինակ՝ 1մգ կամ 1մկգ), ավելացվում է թիվ 0 սկուտեղին, իսկ բաշխման հավասարակշռությունից հետո, քանի որ k=1, այն է՝ ns=nm, nm=ns=0.5։
Երբ կրող գազի ափսեի ծավալը (lΔV) մտնում է 0 թիթեղը պուլսացիայի տեսքով, գազային փուլում nm բաղադրիչ պարունակող կրիչ գազը մղվում է դեպի ափսե 1: Այս պահին ns բաղադրիչը 0 ափսեի հեղուկ փուլում: և 1-ին թիթեղի գազային փուլում նմ բաղադրիչը կվերաբաշխվի երկու փուլերի միջև:Հետևաբար, 0-ում պարունակվող բաղադրիչների ընդհանուր քանակը 0,5 է, որում գազային և հեղուկ փուլերը յուրաքանչյուրը 0,25 է, իսկ 1-ին ափսեում պարունակվող ընդհանուր քանակը նույնպես 0,5 է։Գազային և հեղուկ փուլերը նույնպես 0,25 էին։
Այս գործընթացը կրկնվում է ամեն անգամ, երբ նոր ափսեի ծավալի կրիչ գազը պտտվում է սյունակում (տես ստորև աղյուսակը):
(4) Քրոմատոգրաֆիկ արտահոսքի կորի հավասարում
σ ստանդարտ շեղումն է, պահպանման ժամանակն է, C-ը ցանկացած պահի կոնցենտրացիան է,
C-ն ներարկման կոնցենտրացիան է, այսինքն՝ բաղադրիչների ընդհանուր քանակությունը (Ա գագաթնակետային տարածք):
(5) սյունակի արդյունավետության պարամետրերը
Հաստատուն tR-ի դեպքում որքան փոքր է W կամ w 1/2 (այսինքն, որքան նեղ գագաթը), այնքան մեծ է տեսական թիթեղների թիվը n, այնքան փոքր է տեսական թիթեղների բարձրությունը և այնքան բարձր է սյունակի անջատման արդյունավետությունը:Նույնը վերաբերում է արդյունավետ տեսության սկուտեղի neff-ին:Հետևաբար, սկուտեղների տեսական թիվը ցուցիչ է սյուների արդյունավետությունը գնահատելու համար:
(5)Բնութագրերը և թերությունները
> Առավելությունները
Սկուտեղի տեսությունը կիսաէմպիրիկ է և բացատրում է արտահոսքի կորի ձևը
Բաղադրիչների բաժանման և բաժանման գործընթացները նկարազարդված են
Առաջարկվում է սյունակի արդյունավետությունը գնահատելու ինդեքս
> Սահմանափակումներ
Բաղադրիչները իրականում չեն կարող հասնել բաշխման հավասարակշռության երկու փուլերում.
Սյունակում բաղադրիչների երկայնական տարածումը չի կարելի անտեսել.
Զանգվածի փոխանցման գործընթացի վրա տարբեր կինետիկ գործոնների ազդեցությունը հաշվի չի առնվել:
Սյունակի ազդեցության և շարժական փուլի հոսքի արագության միջև կապը չի կարող բացատրվել.
Պարզ չէ, թե որ հիմնական գործոններն են ազդում սյունակի էֆեկտի վրա
Այս խնդիրները գոհացուցիչ կերպով լուծված են փոխարժեքի տեսության մեջ։
2. Գնահատման տեսություն
1956 թվականին հոլանդացի գիտնական ՎանԴիմտերը և այլք.կլանեց սկուտեղի տեսության հայեցակարգը և միավորեց սկուտեղի բարձրության վրա ազդող կինետիկ գործոնները, առաջ քաշեց քրոմատոգրաֆիկ գործընթացի կինետիկ տեսությունը՝ արագության տեսությունը, և ստացավ VanDeemter հավասարումը:Այն դիտարկում է քրոմատոգրաֆիական գործընթացը որպես դինամիկ ոչ հավասարակշռված գործընթաց և ուսումնասիրում է կինետիկ գործոնների ազդեցությունը գագաթնակետի ընդլայնման վրա (այսինքն՝ սյունակի էֆեկտը):
Ավելի ուշ, Giddings and Snyder et al.առաջարկեց հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի արագության հավասարումը (մասնավորապես՝ Գիդինգսի հավասարումը) հիմնված Վանդիմթերի հավասարման վրա (հետագայում կոչվեց գազային քրոմատոգրաֆիայի արագության հավասարում) և ըստ հեղուկի և գազի հատկությունների տարբերության։
(1) Van Deemter հավասարումը
Որտեղ՝ H՝ տախտակի բարձրությունն է
A. պտտվող դիֆուզիոն տերմինի գործակիցը
B. մոլեկուլային դիֆուզիայի տերմինի գործակից
C. զանգվածի փոխանցման դիմադրության տերմինի գործակիցը
(2) Գիդինգսի հավասարումը
Քանակական և որակական վերլուծություն
(1) Որակական վերլուծություն
Որակական քրոմատոգրաֆիական վերլուծությունը յուրաքանչյուր քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետով ներկայացված միացությունների որոշման համար է:Քանի որ տարբեր նյութեր որոշակի քրոմատոգրաֆիկ պայմաններում ունեն որոշակի պահպանման արժեքներ, պահպանման արժեքը կարող է օգտագործվել որպես որակական ինդեքս:Տարբեր քրոմատոգրաֆիկ որակական մեթոդներ ներկայումս հիմնված են պահպանման արժեքների վրա:
Այնուամենայնիվ, միևնույն քրոմատոգրաֆիկ պայմաններում տարբեր նյութեր կարող են ունենալ համանման կամ նույնական պահպանման արժեքներ, այսինքն՝ պահպանման արժեքները բացառիկ չեն:Այսպիսով, դժվար է բնութագրել բոլորովին անհայտ նմուշը միայն պահպանման արժեքների հիման վրա:Եթե նմուշի աղբյուրը, բնույթը և նպատակը հասկանալու հիման վրա կարելի է նախնական դատողություն անել նմուշի բաղադրության վերաբերյալ, և կարող են օգտագործվել հետևյալ մեթոդները՝ քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետով ներկայացված միացությունը որոշելու համար.
1. Մաքուր նյութերի օգտագործմամբ որակական հսկողություն
Որոշակի քրոմատոգրաֆիկ պայմաններում անհայտը ունի միայն սահմանված պահպանման ժամանակ:Հետևաբար, անհայտը կարող է որակապես նույնականացվել՝ համեմատելով հայտնի մաքուր նյութի պահպանման ժամանակը նույն քրոմատոգրաֆիկ պայմաններում անհայտ նյութի պահպանման ժամանակի հետ:Եթե երկուսը նույնն են, անհայտ նյութը կարող է լինել հայտնի մաքուր նյութ.Հակառակ դեպքում անհայտը մաքուր նյութ չէ։
Մաքուր նյութի վերահսկման մեթոդը կիրառելի է միայն այն անհայտ նյութի նկատմամբ, որի բաղադրությունը հայտնի է, որի բաղադրությունը համեմատաբար պարզ է, և որի մաքուր նյութը հայտնի է:
2. Հարաբերական պահպանման արժեքի մեթոդ
α հարաբերական պահպանման արժեքը վերաբերում է i բաղադրիչի և տեղեկատու նյութերի միջև ճշգրտմանը Պահման արժեքների հարաբերակցությունը.
Այն փոխվում է միայն ֆիքսատորի և սյունակի ջերմաստիճանի փոփոխությամբ, և գործառնական այլ պայմանների հետ կապ չունի:
Որոշակի անշարժ փուլի և սյունակի ջերմաստիճանի դեպքում i բաղադրիչի և տեղեկատու նյութի s-ի ճշգրտված պահպանման արժեքները չափվում են համապատասխանաբար, այնուհետև հաշվարկվում են վերը նշված բանաձևի համաձայն:Ստացված հարաբերական պահպանման արժեքները կարելի է որակապես համեմատել գրականության համապատասխան արժեքների հետ։
3՝ ավելացնելով հայտնի նյութեր՝ գագաթնակետի բարձրության մեթոդը բարձրացնելու համար
Երբ անհայտ նմուշում շատ բաղադրիչներ կան, ստացված քրոմատոգրաֆիկ գագաթները չափազանց խիտ են վերը նշված մեթոդով հեշտությամբ նույնականացնելու համար, կամ երբ անհայտ նմուշն օգտագործվում է միայն նշված նյութի վերլուծության համար:
«Սկզբում կազմվում է անհայտ նմուշի քրոմատոգրամ, իսկ հետո ստացվում է հետագա քրոմատոգրամ՝ անհայտ նմուշին հայտնի նյութ ավելացնելով»:Նման նյութերի համար կարող են հայտնի լինել գագաթների բարձրության բարձրությամբ բաղադրիչները:
4. Պահպանել ինդեքսի որակական մեթոդը
Պահպանման ինդեքսը ներկայացնում է նյութերի պահպանման պահվածքը ֆիքսատիվ նյութերի վրա և ներկայումս հանդիսանում է GC-ում ամենաշատ օգտագործվող և միջազգայնորեն ճանաչված որակական ինդեքսը:Այն ունի լավ վերարտադրելիության, միասնական ստանդարտի և ջերմաստիճանի փոքր գործակիցի առավելությունները:
Պահպանման ինդեքսը կապված է միայն անշարժ փուլի և սյունակի ջերմաստիճանի հատկությունների հետ, բայց ոչ այլ փորձարարական պայմանների հետ:Նրա ճշգրտությունն ու վերարտադրելիությունը գերազանց են:Քանի դեռ սյունակի ջերմաստիճանը նույնն է, ինչ անշարժ փուլի ջերմաստիճանը, գրականության արժեքը կարող է կիրառվել նույնականացման համար, և անհրաժեշտ չէ օգտագործել մաքուր նյութը համեմատության համար:
(2) Քանակական վերլուծություն
Քրոմատոգրաֆիական քանակականացման հիմքը.
Քանակական վերլուծության խնդիրն է գտնել խառը նմուշի բաղադրիչներից հարյուրը
Կոտորակային բովանդակություն.Քրոմատոգրաֆիական քանակականացումը հիմնված էր հետևյալի վրա. երբ գործառնական պայմանները համահունչ էին, եղել է
Չափված բաղադրիչի զանգվածը (կամ կոնցենտրացիան) որոշվում է դետեկտորի կողմից տրված արձագանքման ազդանշանով
Համաչափ է։Այսինքն:
Քրոմատոգրաֆիական քանակականացման հիմքը.
Քանակական վերլուծության խնդիրն է գտնել խառը նմուշի բաղադրիչներից հարյուրը
Կոտորակային բովանդակություն.Քրոմատոգրաֆիական քանակականացումը հիմնված էր հետևյալի վրա. երբ գործառնական պայմանները համահունչ էին, եղել է
Չափված բաղադրիչի զանգվածը (կամ կոնցենտրացիան) որոշվում է դետեկտորի կողմից տրված արձագանքման ազդանշանով
Համաչափ է։Այսինքն:
1. Պիկ տարածքի չափման մեթոդ
Պիկ տարածքը քրոմատոգրամների կողմից տրամադրվող հիմնական քանակական տվյալներն են, և գագաթնակետի տարածքի չափման ճշգրտությունը ուղղակիորեն ազդում է քանակական արդյունքների վրա:Տարբեր չափման մեթոդներ են կիրառվել տարբեր գագաթային ձևերով քրոմատոգրաֆիկ գագաթների համար:
Քանակական վերլուծության մեջ դժվար է գտնել ձմռան ճշգրիտ արժեքը.
Մի կողմից ներարկման բացարձակ ծավալը ճշգրիտ չափելու դժվարության պատճառով. մյուս կողմից
Պիկ տարածքը կախված է քրոմատոգրաֆիկ պայմաններից, և քրոմատոգրաֆիկ շերտը պետք է պահպանվի, երբ արժեքը չափվում է
Նույն բանն անելը ոչ հնարավոր է, ոչ էլ հարմար։Եվ նույնիսկ եթե դուք կարողանաք ճիշտ ստանալ
Ճշգրիտ արժեքը, նաև այն պատճառով, որ չկա միասնական ստանդարտ և չի կարող ուղղակիորեն կիրառվել:
2.Քանակական ուղղման գործոն
Քանակական ուղղման գործակիցի սահմանում. դետեկտոր մուտք գործող բաղադրիչների քանակը (մ)
Նրա քրոմատագրական գագաթնակետի տարածքի (A) կամ գագաթի բարձրության () հարաբերակցությունը համաչափության հաստատուն է (,
Համաչափության հաստատունը կոչվում է բաղադրիչի բացարձակ ուղղման գործակից:
Քանակական վերլուծության մեջ դժվար է գտնել ձմռան ճշգրիտ արժեքը.
Մի կողմից ներարկման բացարձակ ծավալը ճշգրիտ չափելու դժվարության պատճառով. մյուս կողմից
Պիկ տարածքը կախված է քրոմատոգրաֆիկ պայմաններից, և քրոմատոգրաֆիկ շերտը պետք է պահպանվի, երբ արժեքը չափվում է
Նույն բանն անելը ոչ հնարավոր է, ոչ էլ հարմար։Եվ նույնիսկ եթե դուք կարողանաք ճիշտ ստանալ
Ճշգրիտ արժեքը, նաև այն պատճառով, որ չկա միասնական ստանդարտ և չի կարող ուղղակիորեն կիրառվել:
Այսինքն՝ բաղադրիչի հարաբերական ուղղման գործակիցը բաղադրիչն է և հղման նյութը
Բացարձակ ուղղիչ գործոնների հարաբերակցությունը.
Կարելի է տեսնել, որ հարաբերական ուղղման գործոնն այն է, երբ բաղադրիչի որակն ընդդեմ ստանդարտի:
Երբ s նյութը հավասար է, հղման նյութի գագաթնակետային տարածքը բաղադրիչի գագաթնակետային տարածքն է
Բազմաթիվ.Եթե որևէ բաղադրիչ ունի m զանգված և գագաթնակետային մակերես A, ապա f'A թիվը
Արժեքները հավասար են հղման նյութի գագաթնակետին զանգվածով:Այլ կերպ ասած,
Հարաբերական ուղղման գործակցի միջոցով կարելի է առանձնացնել յուրաքանչյուր բաղադրիչի գագաթնակետային տարածքները
Փոխակերպվում է հղման նյութի գագաթնակետին, որը հավասար է դրա զանգվածին, ապա հարաբերակցությանը
Ստանդարտը միասնական է.Այսպիսով, սա նորմալացված մեթոդ է յուրաքանչյուր բաղադրիչի տոկոսը պարզելու համար
Քանակի հիմքը.
Հարաբերական ուղղիչ գործոնի ստացման մեթոդ. հարաբերական ուղղիչ գործոնի արժեքները համեմատվել են միայն լինելու հետ
Չափումը կապված է ստանդարտի և դետեկտորի տեսակի հետ, բայց գործառնական ժապավենի հետ
Կարեւոր չէ։Հետևաբար, արժեքները կարող են վերցվել գրականության հղումներից:Եթե տեքստը
Եթե առաջարկի մեջ չեք գտնում ցանկալի արժեքը, կարող եք նաև ինքներդ որոշել այն:Որոշման մեթոդ
Մեթոդ. Չափված նյութի որոշակի քանակություն տասը ընտրված տեղեկատու նյութ → ստացված է որոշակի կոնցենտրացիայի մեջ
Չափվել են երկու բաղադրիչների քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետային տարածքները A և As:
Դա բանաձեւն է:
3. Քանակական հաշվարկի մեթոդ
(1) Տարածքի նորմալացման մեթոդ
Բոլոր պիկ ազատ ֆրակցիաների պարունակության գումարը քանակականացման համար հաշվարկվել է 100%
Մեթոդը կոչվում է նորմալացում:Դրա հաշվարկման բանաձևը հետևյալն է.
Որտեղ P,% -ը փորձարկված բաղադրիչների տոկոսային պարունակությունն է.A1, A2... A n-ը բաղադրիչ 1 է: Պիկ մակերեսը 1~n;f'1, f'2... f'n-ը 1-ից n բաղադրիչների հարաբերական ուղղման գործակիցն է:
(2) արտաքին ստանդարտ մեթոդ
Նմուշում փորձարկվող բաղադրիչի արձագանքման ազդանշանի և որպես հսկիչ փորձարկվող մաքուր բաղադրիչի քանակական համեմատության մեթոդը:
(3) Ներքին ստանդարտ մեթոդ
Այսպես կոչված ներքին ստանդարտ մեթոդը մեթոդ է, երբ որոշակի քանակությամբ մաքուր նյութ ավելացվում է փորձարկվող նյութի ստանդարտ լուծույթին և նմուշի լուծույթին որպես ներքին ստանդարտ, այնուհետև վերլուծվում և որոշվում է:
(3) ստանդարտ ավելացման մեթոդ
Ստանդարտ գումարման մեթոդը, որը նաև հայտնի է որպես ներքին հավելման մեթոդ, որոշակի քանակությամբ (△C) ավելացնելն է:
Փորձարկվող նյութի հղումը ավելացվել է փորձարկվող նմուշի լուծույթին, իսկ թեստն ավելացվել է փորձարկմանը
Նյութից հետո նմուշի լուծույթի գագաթնակետը ավելի բարձր է եղել, քան սկզբնական նմուշի լուծույթը
Տարածքի աճը (△A) օգտագործվել է նմուշի լուծույթում նյութի կոնցենտրացիան հաշվարկելու համար
Բովանդակություն (Cx)
Որտեղ կացինը սկզբնական նմուշում չափվող նյութի գագաթնակետային տարածքն է:
Հրապարակման ժամանակը՝ Մար-27-2023