Հեղուկ շարժական փուլերի օգտագործման տասը ընդհանուր սխալ:

Շարժական փուլը համարժեք է արյան հեղուկ փուլին, և կան տարբեր բաներ, որոնց պետք է ուշադրություն դարձնել օգտագործման ժամանակ։ Դրանց թվում կան մի քանի «որոգայթներ», որոնց վրա պետք է ուշադրություն դարձնել։

01. Չափել շարժական փուլի pH-ը օրգանական լուծիչ ավելացնելուց հետո

Եթե ​​դուք չափում եք pH-ը օրգանական հավելումով, ապա ստացված pH-ը տարբեր կլինի, քան օրգանական լուծիչ ավելացնելուց առաջ: Այնուամենայնիվ, ամենակարեւորը հետեւողական լինելն է։ Եթե ​​դուք միշտ չափում եք pH-ը օրգանական լուծիչ ավելացնելուց հետո, համոզվեք, որ նշեք ձեր քայլերը ձեր օգտագործած մեթոդի մեջ, որպեսզի մյուսները հետևեն նույն մեթոդին: Այս մեթոդը 100% ճշգրիտ չէ, բայց գոնե այն կպահի մեթոդը հետևողական: Սա կարող է ավելի կարևոր լինել, քան ճշգրիտ pH արժեք ստանալը:

02. Բուֆեր չի օգտագործվում

Բուֆերի նպատակն է վերահսկել pH-ը և կանխել դրա փոփոխությունը: Շատ այլ մեթոդներ փոխում են շարժական փուլի pH-ը, ինչը կարող է առաջացնել պահպանման ժամանակի, գագաթնակետի ձևի և գագաթնակետային արձագանքի տեղաշարժեր:

Մրջնաթթուն, TFA և այլն բուֆերներ չեն

03. Բուֆեր չօգտագործելը նորմալ pH միջակայքում

Յուրաքանչյուր բուֆեր ունի pH 2 միավորի տիրույթի լայնություն, որի շրջանակներում այն ​​ապահովում է pH-ի լավագույն կայունությունը: Այս պատուհանից դուրս բուֆերները արդյունավետ դիմադրություն չեն ցուցաբերի pH-ի փոփոխություններին: Կամ օգտագործեք բուֆեր ճիշտ տիրույթում, կամ ընտրեք բուֆեր, որը ծածկում է ձեզ անհրաժեշտ pH միջակայքը:

04. Օրգանական լուծույթին ավելացնել բուֆեր

Բուֆերային լուծույթը օրգանական փուլի հետ խառնելը, ամենայն հավանականությամբ, կհանգեցնի բուֆերի նստվածքին: Շատ դեպքերում, նույնիսկ եթե տեղումներ են եղել, այնուամենայնիվ դժվար է հայտնաբերել: Հիշեք, որ միշտ օրգանական լուծույթն ավելացրեք ջրային փուլին, ինչը կարող է զգալիորեն նվազեցնել բուֆերային տեղումների հավանականությունը:

05. Պոմպով խառնել կոնցենտրացիայի գրադիենտը 0%-ից

Այսօր առկա պոմպերը կարող են արդյունավետորեն խառնել շարժական փուլերը և ներկառուցված գազազերծումը, բայց ոչ բոլորն, ովքեր օգտագործում են ձեր մեթոդը, կունենան բարձրորակ պոմպ: Խառնեք A-ն և B-ն մեկ լուծույթի մեջ և գործարկեք այն 100% ներդիրով:

Օրինակ՝ 950 մլ օրգանական սկզբնական խառնուրդ կարելի է պատրաստել՝ խառնելով 50 մլ ջրի հետ։ Դրա առավելությունն այն է, որ այն կարող է նվազեցնել HPLC-ների միջև փոփոխականությունը և նվազեցնել համակարգում փուչիկների և տեղումների հավանականությունը: Հարկ է նշել, որ պոմպի խառնուրդի հարաբերակցությունը 95:5 է, ինչը չի նշանակում, որ շշի մեջ նախապես խառնված պահպանման ժամանակը նույնպես 95:5 է:

06. Բուֆերը փոխելու համար ճիշտ ձևափոխված թթու (հիմք) չօգտագործելը

Օգտագործեք միայն այն թթուն կամ հիմքը, որը կազմում է ձեր օգտագործած բուֆերային աղը: Օրինակ, նատրիումի ֆոսֆատի բուֆերը պետք է պատրաստվի միայն ֆոսֆորաթթվով կամ նատրիումի հիդրօքսիդով:

07. Մեթոդի մեջ բուֆերի մասին ամբողջ տեղեկատվությունը չնշելով, ինչպես օրինակ՝ 5գ ավելացնելընատրիումի ֆոսֆատ մինչև 1000 մլ ջուր.

Բուֆերի տեսակը որոշում է pH միջակայքը, որը կարող է բուֆերացվել: Պահանջվող կոնցենտրացիան որոշում է բուֆերային ուժը: 5 գրամ կամ անջուր նատրիումի ֆոսֆատը և 5 գրամ մոնոնատրիումի ֆոսֆատ մոնոհիդրատն ունեն տարբեր բուֆերային հզորություններ:

08. Ստուգելուց առաջ օրգանական լուծիչների ավելացում

Եթե ​​նախորդ մեթոդը օգտագործում էր բուֆերային լուծում բազային B-ի համար, իսկ ձեր մեթոդը օգտագործում է օրգանական լուծույթ բազային B-ի համար, դուք հուսով ենք, որ կարող եք բուֆերը տեղավորել պոմպի խողովակում և պոմպի գլխում:

09. Բարձրացրեք շիշը և դատարկեք վերջին կաթիլը

Մեծ հավանականություն կա, որ դուք չեք ունենա բավականաչափ շարժական փուլ ամբողջ վազքը ավարտելու համար, և ձեր նմուշը կծխի: Բացի պոմպային համակարգը և սյունը այրելու հնարավորությունից, շարժական փուլն ամբողջությամբ գոլորշիանա, իսկ շշի վերևում գտնվող շարժական փուլը կփոխվի:

10. Օգտագործեք ուլտրաձայնային գազազերծող շարժական փուլ

Ամենակարևոր կետը համոզվելն է, որ բոլոր բուֆերային աղերը լուծված են, բայց սա գազազերծման ամենավատ միջոցն է և արագ տաքացնելու է շարժական փուլը՝ առաջացնելով օրգանական բաղադրիչների գոլորշիացում: Ավելի ուշ անհարկի դժվարություններից խուսափելու համար հինգ րոպե հատկացրեք ձեր շարժական փուլը վակուումային զտելու համար: